Domande d'esame VERIFICATO
risposte domande prova d'esame
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Di cosa parla
- Metodo Bradford e Applicazione:
- Procedura analitica per determinare la concentrazione di proteine in soluzione acquosa tramite analisi spettrofotometrica.
- Utilizza il blu di Comassio che si lega ad amminoacidi basici, generando una colorazione blu.
- Richiede la preparazione di standard esterni e una retta di calibrazione per interpolare la concentrazione del campione ignoto.
- Misurazione dell'assorbanza tramite spettrofotometro.
- Diverse Varianti e Meccanismi in Cromatografia Liquida:
- Distinzione tra cromatografia in fase normale (fase stazionaria polare, fase mobile apolare) e fase inversa (fase stazionaria apolare, fase mobile polare).
- Cromatografia di adsorbimento: Analita adsorbito su matrice solida (es. silice), separazione basata sull'affinità con la fase stazionaria solida.
- Cromatografia di ripartizione: Basata sull'equilibrio di ripartizione dell'analita tra due fasi liquide, con fase stazionaria liquida legata covalentemente a una matrice solida (es. silice C18).
- Cromatografia a scambio ionico: Specifica per molecole ioniche o ionizzabili, con fase stazionaria che presenta gruppi ionici di carica opposta all'analita. Richiede pH e condizioni di soluzione tampone costanti.
- Cromatografia ad esclusione dimensionale: La fase stazionaria consiste in particelle con volume e dimensioni controllate; la separazione avviene in base alla dimensione delle molecole di analita, utilizzata per molecole ad alto peso molecolare.
- Valutazione Effetto Matrice nella Determinazione di Ca:
- Per determinare se l'effetto matrice influisce sulla tecnica analitica, si eseguono analisi tramite spettroscopia atomica.
- Confronto tra metodo degli standard esterni (retta di calibrazione da standard a concentrazione nota) e metodo delle aggiunte standard (aggiunte di Ca+ a frazioni del campione incognito).
- Il metodo delle aggiunte standard calcola l'intercetta della retta con l'asse delle ascisse per ottenere la concentrazione incognita.
- Derivazione della Legge di Lambert-Beer:
- Descrizione della relazione fondamentale che lega l'assorbanza di una soluzione alla concentrazione della sostanza che assorbe e allo spessore del cammino ottico.
- La legge è espressa come A = ceb, dove A è l'assorbanza, c la concentrazione, e il coefficiente di estinzione molare e b il cammino ottico.
- Analizzatore a Tempo di Volo (TOF):
- Tipologia di separatore di massa impiegato nella spettrometria atomica.
- Gli ioni vengono accelerati tramite una differenza di potenziale; avendo la stessa energia cinetica (1/2mv²), ioni con massa maggiore avranno velocità minore e impiegheranno più tempo per raggiungere il rivelatore.
- Nei TOF più semplici il percorso è lineare.
- Per migliorare il potere risolvente, alcuni apparecchi utilizzano un reflectron: una serie di anelli consecutivi a differenza di potenziale crescente, che arresta e ri-accelera gli ioni, rendendo il tempo di volo indipendente dall'energia cinetica iniziale e dalla posizione iniziale degli ioni.