Dispense VERIFICATO
FISH
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Di cosa parla
- Tecniche di ibridazione degli acidi nucleici: include l'ibridazione in situ, Southern, Northern e Dot blot. L'ibridazione in situ permette la localizzazione di specifici acidi nucleici direttamente in cellule e tessuti.
- La PCR amplifica piccoli segmenti di DNA in milioni di copie, permettendo il riconoscimento di sequenze presenti anche in piccole quantità. È utilizzata per screening e determinazione della sequenza del DNA.
- L'ibridazione avviene quando una sonda polinucleotidica complementare al bersaglio si lega specificatamente, formando un ibrido che può essere riconosciuto con traccianti come isotopi o sostanze fluorescenti. La stabilità dell'ibrido dipende dal contenuto di G:C e dalla temperatura di fusione.
- L'ibridazione in situ utilizza tecniche autoradiografiche, microscopio ottico o fluorescente per dimostrare l'ibrido sonda-bersaglio. La CISH e la FISH sono metodi specifici per valutare amplificazioni geniche, traslocazioni cromosomiche e localizzare sequenze di DNA nei cromosomi.
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