Domande della prova intermedia
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Di cosa parla
- Componenti del buffer di lisi per estrazione dei plasmidi: SDS, EDTA, NAOH e KA; funzione di ciascuno.
- "Isoschizomers": enzimi che tagliano lo stesso sito restrittivo producendo estremità diverse.
- Componenti per una reazione di ligasi: buffer, ligaasi, ATP, insert e vettore in ratio 3:1.
- Coloni da aspettarsi con trasformazione CL e eletroporazione utilizzando 0.5 µg di DNA plasmidico.
- Ricombinanti da aspettarsi dopo clonaggio con XbaI; discriminazione mediante digestione restrittiva; dimensioni dei frammenti.
- Strategia di cloning per ottenere il costrutto VECTOR utilizzando solo enzimi restrittivi e plasmidi specifici.
- Metodo più usato per produrre frantumi genomici da clonare in vettori fage per creare una libreria genica.
- Parametri per eseguire hybridizzazioni molcolari a bassa stringicità con probe heterologhi.
- Lambda ZAP vector: specialità e utilizzo.
- Ricombinanti da aspettarsi in PCR di Gene Z; funzione dei componenti della reazione.
- Set di primers per amplificare Gene Z.
- Annealing temperature e ciclo di amplificazione PCR.
- Modifiche per aumentare la specificità del risultato PCR.
- Oligonucleotide degenerato per riconoscere sequenza codifica; uso o meno dell'inosina.
- Costrutti necessari per produrre sistema binario GAL4-UAS per esprimere GENE X in maschi adulti di Drosophila.
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