Advanced cell biology and biotechnology
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Di cosa parla
- Analisi dell'espressione genica: si verifica a tre livelli - DNA > RNA > proteine. Il western blot è un metodo per analizzare l'espressione proteica, ma richiede antibodies specifiche e affidabili.
- Rt-PCR permette di valutare l'espressione mRNA: utilizza primi retrotrasformati per amplificare il DNA cDNA. È importante confrontare risultati con controlli positivi e negativi per verificare la specificità dell'antibody.
- Il western blot separa proteine in base al peso molecolare tramite SDS-PAGE, dove l'SDS denatura le proteine e fornisce una carica negativa uniforme. Il gel contiene bromofenol blu per visualizzare la progressione dell'elettrorfisi e glicerolo per facilitare il caricamento delle campionature.
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