Appunti VERIFICATO
Biochimica clinica
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Di cosa parla
- Unità di Misura e Concentrazione:
- Spiega le unità di misura per la concentrazione (molarità, percentuale, massa, ppm, ppb, ppt) e l'importanza del peso molecolare per le conversioni.
- Presenta calcoli di esempio per sostanze biologiche e la tabella dei multipli e sottomultipli decimali.
- Metodi di Analisi Biochimiche:
- Distingue tra metodi diretti (elettrochimici, fotometria atomica) e indiretti (chimici, enzimatici, immunochimici, cromatografici).
- Descrive come le onde elettromagnetiche (assorbite, rifratte, riflesse, prodotte) sono usate in fotometria, spettrofotometria, rifrattometria, turbidimetria, nefelometria, fluorimetria e luminometria.
- Spiega la relazione tra assorbanza, trasmittanza e concentrazione.
- Metodi Enzimatici:
- Illustra la misurazione dell'attività catalitica enzimatica (unità, katal) e i fattori che la influenzano (temperatura, pH, concentrazione di substrato).
- Descrive i saggi “a termine” e “cinetici”, includendo le reazioni accoppiate (perossidasi, deidrogenasi NAD-dipendenti).
- Fornisce esempi di dosaggio per vari analiti (glucosio, lattato, creatinina, colesterolo, transaminasi, ecc.) e la classificazione degli enzimi.
- Metodi Elettroforetici:
- Dettaglia la separazione di molecole cariche (proteine, acidi nucleici) in base alla carica netta, al pH e al punto isoelettrico.
- Spiega l'SDS-elettroforesi (separazione per peso molecolare) e la focalizzazione isoelettrica (IEF, separazione per pI).
- Descrive l'interpretazione degli elettroferogrammi per la quantificazione e l'identificazione.
- Metodi di Biologia Molecolare (PCR e Sequenziamento):
- Descrive la Polymerase Chain Reaction (PCR) per l'amplificazione del DNA e le sue fasi (denaturazione, annealing, estensione).
- Spiega il sequenziamento del DNA per determinare la sequenza nucleotidica e il DNA barcoding per l'identificazione di specie.
- Presenta vantaggi (sensibilità, specificità) e svantaggi di queste tecniche.
- Metodi Immunochimici (ELISA):
- Illustra l'uso di anticorpi (policlonali o monoclonali) per rilevare antigeni o anticorpi, considerando cross-reattività e specie-specificità.
- Dettaglia i principi dell'ELISA indiretto, competitivo e sandwich, con esempi di applicazione e gestione del segnale.
- Menziona i test lateral flow come metodo diagnostico rapido.
- Controllo Qualità e Interpretazione Diagnostica:
- Affronta la variabilità pre-analitica (prelievo, anticoagulanti, emolisi) e analitica (precisione, accuratezza, LOD, LOQ, LOL).
- Descrive il controllo qualità interno ed esterno, l'uso di carte di controllo (Shewart-Levey-Jennings, Youden plots) per monitorare le prestazioni del laboratorio.
- Spiega l'interpretazione diagnostica tramite sensibilità, specificità, prevalenza e valori predittivi.
- Ormoni in Biochimica Clinica Veterinaria:
- Elenca gli ormoni rilevanti (tiroidei, surrenalici, riproduttivi, ecc.) e le loro applicazioni diagnostiche e terapeutiche, sottolineando l'importanza della specie-specificità.