Domande d'esame VERIFICATO
Domande d'esame - Prof Soriano
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Il documento illustra i processi fondamentali della biologia molecolare: trascrizione e traduzione nei procarioti e negli eucarioti, con i relativi fattori, promotori e terminatori. Tratta poi la topologia del DNA, le topoisomerasi, la replicazione procariotica e la struttura della cromatina con istoni e nucleosomi. Sono descritti anche la regolazione degli operoni lac e trp, il ciclo litico e lisogenico del fago lambda, il processamento di RNA e miRNA e tecniche come PCR, doppio ibrido ed enzimi di restrizione.
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- Trascrizione nei procarioti, con le fasi di inizio, allungamento e terminazione tramite terminatori intrinseci o rho-dipendenti, e trascrizione negli eucarioti, con tre RNA polimerasi, fattori TFII, enhancer, silencer e promotori multipli.
- Traduzione in procarioti ed eucarioti, con attivazione degli amminoacidi da parte delle aa-tRNA sintetasi, inizio tramite sequenza Shine-Dalgarno o sequenza di Kozak, allungamento e terminazione, siti A, P ed E del ribosoma e assemblaggio dei complessi d'inizio.
- Maturazione di RNA, con processamento di tRNA e rRNA, capping, poliadenilazione, splicing ed editing dell'mRNA, cropping e dicing dei miRNA, ribozimi, struttura e polarità dell'RNA, hnRNP e tecnica del doppio ibrido.
- Regolazione genica, con operone lac controllato da glucosio e cAMP, operone trp con repressione e attenuazione, classificazione di operoni inducibili e reprimibili e regolazione dei promotori PR, PL e PRM del fago lambda tra ciclo litico e lisogenico.
- Topologia del DNA, con Lk, Lk0, ΔLk, densità di superelica, equazione di Fuller, superavvolgimenti plectonemici e toroidali, e topoisomerasi di tipo I e II con i rispettivi meccanismi d'azione.
- Replicazione del DNA nei procarioti, con inizio da OriC tramite DnaA, DnaB e DnaC, sintesi dei filamenti leading e lagging con primer e frammenti di Okazaki, modello a trombone, terminazione controllata dalle sequenze ter e accorciamento dei telomeri con telomerasi.
- Organizzazione del genoma e tecniche di laboratorio, con nucleosoma e istoni, DNA ripetitivo in tandem e intersparso, teoria del vacillamento, PCR, elettroforesi su gel, enzimi di restrizione e ligasi, oltre agli esperimenti di Griffith, Hershey-Chase e Meselson-Stahl.
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