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Tecnologie ricombinanti
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Genotiche genomica e cDNA, screening necessario per identificare frammenti di interesse. Elettroforesi separa DNA in base alla dimensione utilizzando gel di agarosio. Enzimi di restrizione tagliano DNA a siti specifici (I, III, II), formando estremità nette o protrudenti; importanti per clonaggio. DNA ligasi riforma legami fosfodiesterici, attiva a 37°C. Plasmidi, vettori di clonaggio piccoli e facilmente manipolabili, con marcatori selezionabili, siti di restrizione unici e origini di replicazione.
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- Genotiche: classificate in genomica (frammenti di DNA genomico) e cDNA (frammenti di cDNA), con rappresentatività variabile a seconda del tipo.
- Elettroforesi: separazione dei frammenti di DNA basata sulla dimensione, utilizzando un gel di agarosio; i marker aiutano nella stima delle dimensioni.
- Enzimi di restrizione (tipo II): tagliano il DNA in sequenze palindromiche, generando estremità protrudenti o nette; utilizzati per la formazione di ibridi ricombinanti e controllati con parametri specifici.
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Di cosa parla l'insegnamento
TECNOLOGIE RICOMBINANTI · 2° anno · 6 CFU · BIO/11
Lo studente sapra' valutare, conoscendone le basi molecolari, quale approccio generale e quali tecniche applicare, tra quelle acquisite, per la risoluzione di una problematica biologica di base, legata ad un clonaggio molecolare, all’amplificazione di sequenze di DNA e al loro sequenziamento. Lo studente acquisira'…