Dispense VERIFICATO
Metodi
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Di cosa parla
- La cromatografia è un metodo fondamentale per separare i singoli componenti di una miscela dopo l'isolamento, con applicazioni chiave nelle basi della medicina di laboratorio.
- Si distinguono principalmente la **Cromatografia Liquida (LC)**, che include la Cromatografia su Strato Sottile (TLC), la Cromatografia su Colonna (gravitazionale e ad alta efficienza - HPLC), e la **Gas-Cromatografia (GC)**.
- Il principio di base delle separazioni cromatografiche si fonda sulla competizione tra le forze che tendono a "legare" i componenti alla fase stazionaria (fissa) e quelle che li "staccano" ed eluono con la fase mobile (eluente).
- I **Metodi Cromatografici** sono classificati in base alla fase mobile:
- **Per Fase Mobile Liquida (LC):** Adsorbimento Liquido-Solido (TLC, Colonne), Ripartizione Liquido-Liquido (HPLC), Scambio Ionico, Esclusione Molecolare (Gel permeation), Affinità.
- **Per Fase Mobile Gassosa (GC):** Adsorbimento Gas-Solido, Ripartizione Gas-Solido.
- Le **Tecniche Cromatografiche** specifiche includono:
- **Cromatografia Piana:** Su Carta e su Strato Sottile (TLC).
- **Cromatografia su Colonna (LC):** A Pressione Atmosferica (gravitazionale) e ad Alta Efficienza (HPLC).
- **Cromatografia su Colonna (GC):** Colonne Impaccate e Colonne Capillari.
- Nelle Cromatografie Liquide, la **polarità della fase mobile** è cruciale per determinare la forza e la velocità di eluizione dei componenti. Nella GC, la fase mobile è un **gas inerte di trasporto**, mentre nell'HPLC la **pressione di esercizio** è una caratteristica distintiva.
- Il **Fattore di Ritenzione (R)** in TLC è il parametro che quantifica il movimento di un prodotto rispetto al fronte dell'eluente, essenziale per la sua caratterizzazione e dipendente dall'eluente.
- La **Serie Eluotropica** è un elenco di solventi ordinati per la loro forza eluente, fornendo una guida per la selezione della fase mobile più adatta.
- I meccanismi di separazione illustrati comprendono Adsorbimento (in fase normale e inversa), Scambio Ionico ed Esclusione Dimensionale.