Appunti VERIFICATO
Biologia molecolare degli eucarioti
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Di cosa parla
- Analisi dei geni: il sequenziamento del DNA è fondamentale per identificare geni, sequenze regolatrici e mutazioni responsabili di malattie umane.
- Storia del sequenziamento: scoperta del DNA da Meischer alla fine del 1800, conferma della sua funzione genetica con la struttura a doppia elica di Watson e Crick nel 1953, sviluppo delle tecniche di Sanger e Gilbert negli anni '70.
- Metodo di Sanger: utilizza l'incorporazione selettiva di dideossinucleotidi durante la replicazione del DNA per generare frammenti di diversa lunghezza che terminano con un nucleotide specifico, separati in gel e letti dal fondo.
- Tecnologie moderne: evoluzione al sequenziamento capillare e l'uso di nucleotidi fluorescenti per identificare i vari frammenti, generando elettroferogrammi che permettono la lettura delle sequenze.
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