Compiti ed esercitazioni VERIFICATO
domanda a risposta multipla di biologia molecolare
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Di cosa parla
- Struttura DNA:
- Z-DNA: elica sinistrorsa. B-DNA: elica destrorsa.
- Bromuro di etidio si lega al DNA tramite interazioni idrofobiche con le basi.
- Denaturazione DNA: favorita da basse forze ioniche o NaOH.
- DNA circolare rilassato con 1050 basi ha un Linking Number.
- DNA: due eliche complementari e antiparallele con desossiribosio.
- Quantificazione DNA (spettrofotometria): sfrutta regione UV.
- Se 20% Timina, Citosina è al 30%.
- Nucleoside: zucchero pentoso + base azotata.
- Replicazione DNA:
- Replicazione: semi-conservativa.
- Frammenti Okazaki (procarioti): 100-200 nt, sintetizzati su filamento lento.
- DNA polimerasi: duplicano DNA, attività esonucleasica.
- T4 DNA ligasi: unisce frammenti DNA con ATP.
- PCR fasi: denaturazione, ibridazione primer, estensione.
- Taq polimerasi (PCR): termostabile, richiede Mg++, sintetizza DNA.
- Inneschi RNA (primer) per replicazione: circa 10 nucleotidi.
- Cromosomi lievito: replicazione bidirezionale da più origini.
- Trascrizione & Regolazione:
- RNA polimerasi E. coli: trascrive 5'->3', usa fattore sigma per promotore.
- Promotori procariotici: sequenze conservate in -10 e -35.
- mRNA da stampo 5'-AGGTCGAAGCTC-3': 5'-GAGCUUCGACCU-3'.
- Operone lac: gene I regolatore negativo in trans, CAP (CRP) regolatore positivo in trans.
- Lattosio: induce trascrizione legandosi a repressore.
- Operone con geni strutturali: un promotore e un terminatore.
- Geni in eucromatina: alta probabilità di trascrizione negli eucarioti.
- Traduzione Proteica:
- mRNA 300 nt: codifica 100 aminoacidi.
- Aminoacidi si legano al tRNA: tramite carbonio carbossilico.
- Ribosomi: composti da RNA e Proteine, per sintesi proteica.
- Codice genetico degenerato: un aminoacido da più codoni.
- Codone di inizio: AUG.
- Legame peptidico: tra gruppo carbossilico AA e gruppo amminico successivo, con eliminazione H2O.
- Clonaggio & Tecniche Molecolari:
- Vettore per grandi DNA: YAC.
- Plasmidi (clonaggio): selezione con resistenza antibiotici.
- Enzimi di restrizione (endonucleasi) Classe II: non agiscono su DNA batterico per metilazione sequenze riconoscimento; proteggono da batteriofagi 'in vivo'.
- Elettroforesi DNA: separa per peso molecolare (e carica), DNA migra verso polo positivo.
- Varie:
- Mutazione missenso: sostituzione aminoacido.
- Tipi principali RNA in cellule: 3.
- Proteina a pH > punto isoelettrico: carica netta negativa.
- Sequenza complementare 5'-ATACGGCATCGGC-3': 3'-TATGCCGTAGCCG-5'.
- Appaiamenti RNA (es. tRNA): U-A possibili.
- DNA eucariotico + istoni: formano nucleosomi.
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