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Lezione 5 - clinical virology and antiviral resistance

Università degli studi di Siena medical biotechnologies - biotecnologie mediche 2021
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Mantenimento delle cellule in cultura richiede regolare controllo e gestione per supportare il crescimeento virale. Per la passata di cellule, si utilizzano enzimi come trismina o EDTA. Isolamento del virus in culturazione: necessita campioni clinici, cellule sensibili, medio di crescita appropriato, e strumenti sterilizzati. Tecniche microscopiche come contrasto di fase e fluorescenza aiutano a identificare la presenza di virus. Tecniche come inibizione dell'agglutinazione e neutralizzazione del virus permettono l'identificazione del tipo virale. Sistemi rapidi per il "isolamento" del virus utilizzano cellule stressate o linee cellulari reporter per r
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  • Manutenzione delle cellule in culturazione: controllo periodico della capacità di supportare il crescita virale; conservazione a -196°C in azoto liquido per lungo periodo; sperimentazione per contaminazioni o decadimento delle cellule.
  • Subcultura: dettata dalla necessità di dividere le cellule tra confezioni, utilizzando triterina o EDTA per la desettatura delle cellule.
  • Isolamento virale in culturazione cellulare: richiede campioni clinici (es. fiammella faringea, sangue), cellule sensibili e medio di crescita adatti; attrezzature sterile (cabinetto a rischio biologico, termostato, centrifuga); monitoraggio della replicazione virale tramite microscopia ottica o tecniche basate su anticorpi e assai nucleici.
  • Microscopia ottica: tecnica per la visualizzazione di cellule viventi non colorate; differenze tra cellule infette e non infette, esempio di sincitio e multinucleati da virus herpes semplice, lisi da adenovirus.
  • Hemadsorzione e hemagglutinazione: tecniche per la deteczione del virus in culturazione cellulare; differenze tra i due fenomeni e applicazioni con virus come influenza, morbillo, rubella.
  • Microscopia fluorescenza: utilizzo di anticorpi fluorescenti per identificare viral antigene in cellule infette o campioni clinici; tecniche dirette e indirette.
  • Virus neutralizzazione: tecnica basata sulla capacità degli anticorpi neutralizzanti di bloccare l'attività virale, esempio con poliovirus.
  • Sistemi rapidi per la deteczione del virus: tecniche che identificano prodotti virali prima della completa replicazione; approcci come stress cellulare e linee cellulari reporter.

Riassunto generato con l'intelligenza artificiale a partire dagli appunti. Come lo facciamo

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