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Lezione 5 - clinical virology and antiviral resistance
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Di cosa parla
- Manutenzione delle cellule in culturazione: controllo periodico della capacità di supportare il crescita virale; conservazione a -196°C in azoto liquido per lungo periodo; sperimentazione per contaminazioni o decadimento delle cellule.
- Subcultura: dettata dalla necessità di dividere le cellule tra confezioni, utilizzando triterina o EDTA per la desettatura delle cellule.
- Isolamento virale in culturazione cellulare: richiede campioni clinici (es. fiammella faringea, sangue), cellule sensibili e medio di crescita adatti; attrezzature sterile (cabinetto a rischio biologico, termostato, centrifuga); monitoraggio della replicazione virale tramite microscopia ottica o tecniche basate su anticorpi e assai nucleici.
- Microscopia ottica: tecnica per la visualizzazione di cellule viventi non colorate; differenze tra cellule infette e non infette, esempio di sincitio e multinucleati da virus herpes semplice, lisi da adenovirus.
- Hemadsorzione e hemagglutinazione: tecniche per la deteczione del virus in culturazione cellulare; differenze tra i due fenomeni e applicazioni con virus come influenza, morbillo, rubella.
- Microscopia fluorescenza: utilizzo di anticorpi fluorescenti per identificare viral antigene in cellule infette o campioni clinici; tecniche dirette e indirette.
- Virus neutralizzazione: tecnica basata sulla capacità degli anticorpi neutralizzanti di bloccare l'attività virale, esempio con poliovirus.
- Sistemi rapidi per la deteczione del virus: tecniche che identificano prodotti virali prima della completa replicazione; approcci come stress cellulare e linee cellulari reporter.
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