Domande d'esame VERIFICATO
DOMANDE d'ESAME METODOLOGIE
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Di cosa parla
- Per scegliere la soluzione tamponante per le proteine, si considera l'acido debole con la sua base coniugata e si calcola la pKa utilizzando l'equazione di Henderson-Hasselbach. La pKa deve essere vicina al pH del campione.
- I sali caotropici aumentano la solubilità delle proteine in alta concentrazione, causando una parziale denaturazione senza precipitazione, mentre i cosmotropici riducono la solubilità e favoriscono la precipitazione.
- Tecniche di separazione del solvente includono la dialisi e l'ultrafiltrazione, che utilizzano membrane semipermeabili per rimuovere piccole molecole.
- Raffreddare il campione durante la preparazione di un estratto grezzo evita la denaturazione delle proteine e la possibile riattivazione dell'attività proteolitica.
- Forze idrofobiche mantengono l'ordine del folding proteico, mentre forze centrifughe accelerano la sedimentazione delle particelle in condizioni di non equilibrio.
- Nel processo di centrifugazione, le forze in gioco includono la forza centifuga, la forza di Archimede e la forza di attrito. La velocità costante di sedimentazione è definita come \(v = \frac{r(C_p - C_m)}{\eta}\).
- Per separare le componenti cellulari all'inizio del processo di purificazione si utilizza la centrifugazione differenziale, che permette la sedimentazione sequenziale basata sulle dimensioni e densità.
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