Appunti VERIFICATO
PRINCIPI DI BIOLOGIA MOLECOLARE
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Di cosa parla
- Assemblaggio Nucleosomi & Cromatina: Il DNA si avvolge attorno a un core ottamerico di istoni (H3-H4, H2A-H2B). La cromatina è eucromatina (trascrizionalmente attiva) o eterocromatina (compatta, inattiva, con H1).
- Ciclo Cellulare: Composto da interfase (G1, S per duplicazione DNA, G2) e mitosi (profase, metafase, anafase, telofase, citochinesi).
- DNA Polimerasi & Replicazione: Enzima 5'→3' fondamentale per la replicazione semiconservativa del DNA, assistito da elicasi e primasi che sintetizzano primer RNA. Dotato di attività esonucleasica per riparare errori. La replicazione coinvolge complessi come ORC e Mcm-2-7.
- Trascrizione & RNA Polimerasi: L'RNA polimerasi, guidata da fattori sigma (es. σ70), inizia la trascrizione da promotori specifici, catalizzando la sintesi di RNA 5'→3'.
- Maturazione mRNA: Include il capping 5' (metilguanina) e la poliadenilazione 3' (coda poli-A). Lo splicing rimuove gli introni e unisce gli esoni, generando variabilità genetica, mediato da spliceosomi.
- Struttura DNA/RNA: Descrizione delle strutture primarie (basi, zuccheri, legami fosfodiesterei). Il DNA presenta conformazioni secondarie (A, B, Z, tripla elica, forcine) e una terziaria superavvolta. L'RNA forma tetraloop e pseudonodi.
- Riparazione DNA: Diversi meccanismi correggono danni. La riparazione diretta annulla il danno (fotoriattivazione), l'escissione rimuove nucleotidi errati (complesso Uvr), il mismatch repair corregge appaiamenti sbagliati. La ricombinazione omologa ripara rotture a doppio filamento usando un omologo come stampo (coinvolge Rec e Ruv). La translesione permette la copia di frammenti danneggiati.
- Sequenziamento DNA: Tecniche come Sanger (ddNTP per terminazione, elettroforesi) e Pirosequenziamento (emissione di luce da pirofosfato) permettono di determinare la sequenza nucleotidica.
- Regolazione Genica: Operoni (es. lac) mostrano come repressori possano inibire la trascrizione in assenza di specifici induttori. Il complesso del mediatore regola la trascrizione.
- Sequenze Ripetute: Include sequenze in tandem (satelliti, minisatelliti, microsatelliti) e interdisperse (trasposoni, retrotrasposoni come LTR, SINE, LINE).
- Telomerasi & Topoisomerasi: La telomerasi allunga le estremità cromosomiche (telomeri). Le topoisomerasi regolano il superavvolgimento del DNA, tagliando e ricollegando i filamenti.