Proteomica
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Di cosa parla
- Preparazione del campione: SDS page per la prima dimensione basata sul peso molecolare, seguita da seconda dimensione o congelamento a -20°C; buffer di equilibrio contiene SDS, urea e glicerolo; riduzione e alchilazione delle proteine, staining con Coomassie o silver.
- Scelta del range pH per migliorare la risoluzione delle proteine: 3-6 per distanza, 6-7.5 per separazione migliore, 7-11 per risoluzione elevata.
- Tecniche di analisi post-elettroforesi: digitalizzazione, spot detection, background subtraction, creazione del gel riferimento, spot-matching, normalizzazione e analisi statistica; vantaggi e limiti dell'elettroforesi bidimensionale e tecniche DIGE per ridurre variabilità tecnica.
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