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PLS2018 TECNICHE CROMATOGRAFICHE
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Di cosa parla
- Introduzione alla Cromatografia:
- Tecniche per separare sostanze in miscele nei loro componenti per analisi qualitative e quantitative.
- Separazione basata sulla distribuzione differenziale tra due fasi: una fissa (stazionaria) e una mobile (eluente).
- La corsa cromatografica sfrutta le diverse proprietà chimico-fisiche e affinità molecolari per le fasi.
- Tipi principali: Gas-cromatografia (GC) con fase mobile gassosa e Cromatografia Liquida (LC) con fase mobile liquida.
- Il risultato è un CROMATOGRAMMA: grafico con picchi (area proporzionale alla concentrazione, tempo di ritenzione caratteristico per l'identificazione).
- Separazione di alcoli tramite Gas-cromatografia con Spettrometria di Massa (GC-MS):
- Scopo: Separare una miscela di alcoli usando un gas cromatografo con rivelatore a spettrometria di massa.
- Principio della Spettrometria di Massa: Ionizzazione di molecole in fase gassosa, separazione degli ioni prodotti e rivelazione.
- Ionizzazione Elettronica: Il campione gassoso è bombardato con elettroni ad alta energia (70 eV) per rimuovere un elettrone dalla molecola M, formando lo ione molecolare M+. La frammentazione dello ione produce uno spettro di massa caratteristico.
- Procedura di Preparazione:
- Preparazione di soluzioni di metanolo, etanolo e 2-propanolo a 50 ppm (mg/L) da soluzioni madri a 1000 ppm (diluzione 1:20).
- Miscelazione di 1 ml di ciascuna soluzione di acido.
- Iniezione di 1 µl di miscela nel GC-MS.
- Identificazione tramite tempo di ritenzione e spettro di massa.
- Calcolo delle diluizioni basato su V1C1=V2C2.
- Metodica Analitica GC-MS:
- Strumento: GC-MS Thermo 1310-Tsq8000Evo.
- Colonna: Stabilwax®, 30mt, 0.25mm.
- Carrier: He, 1 ml/min.
- Iniettore: Tiniett= 250°C, Split mode, Split flow: 20 ml/min; Split ratio 1:20.
- Forno: Rampa 2°C/min da 40°C a 46°C, poi 40°C/min da 46°C a 200°C.
- Separazione di acidi carbossilici tramite Cromatografia Ionica (IC):
- Scopo: Separare una miscela di due acidi (formico e acetico) mediante cromatografia ionica.
- Principio della Cromatografia Ionica: Tecnica HPLC per la determinazione di anioni e cationi.
- Componenti dello strumento: Pompa di erogazione, colonna di separazione a scambio ionico, rivelatore conduttimetrico con soppressore della conducibilità di fondo.
- Procedura di Preparazione:
- Preparazione di soluzioni di acido formico e acido acetico a 10 ppm (mg/L) da soluzioni madri a 1000 ppm (diluzione 1:100).
- Miscelazione di 1 ml di ciascuna soluzione.
- Iniezione di 20 µl di miscela nel cromatografo ionico.
- Identificazione basata sul tempo di ritenzione.
- Metodica Analitica IC:
- Colonna: Metrohm Organic Acids 250mm x 7.8mm.
- Detector: Conduttimetrico (Professional Vario 945).
- Eluente: H₂SO₄ 0.5 mM.
- Flusso: 0.6 mL/min.
- Temperatura: Ambiente.